肝素是具有抗凝血活性的一种物质,在溶液中肝素钠含量越大,抗凝血作用越强。我国生产的肝素钠产品,大多采用羊血浆法测定其效价。它的原理是在羊血浆内加入标准品和检测品在等羊血浆重钙化一定时间后观察标准品和供试品肝素钠加人管的凝固度,如标准品和供试品配成相同浓度而又得到相同凝固度,则说明它们的效价也相同,如此来对比测定未知样品的效价。以下是羊血浆检测肝素效价的步骤。
肝素钠粉末
- 根据预估效价称取需要检测的肝素粉末;
- 加入0.9%生理盐水将肝素钠粉末溶解,定容至100毫升;
- 取出2毫升定容后的肝素溶液,定容至50毫升,就得到了待检溶液;
- 取出两组实验试管,每组各10支,两组分别注入的标准肝素溶液和待检溶液110微升至200微升(为避免记混,可在试管上标记加入的量);
- 每根管子中加入8%柠檬酸钠溶液20微升,再加入25%氯化钙0.8毫升;
- 解冻过滤后的羊血浆每管加入1ml;
- 将每支试管盖好胶塞,翻转3-4次混匀,使内壁湿润;
- 垂直放入38℃的水域中1小时后取出观察各管的凝固程度,记录确定标准样品及待检样品的1/2凝固点对应的肝素溶液体积,并读数。
待检样品效价计算公式:
F=待检样品估计效价x标品1/2凝固点微升数÷样品1/2凝固点微升数
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